电泳凝胶百科知识-电泳凝胶百科知识大全

电泳凝胶是什么?

以凝胶为介质,在电场作用下分离蛋白质或核酸等分子的分离纯化技术。

凝胶电泳是一种根据分子的大小和电荷对大分子(DNA、RNA和蛋白质)及其片段进行分离和分析的方法。它在临床化学中用于按电荷或大小分离蛋白质(IEF琼脂糖,基本上与大小无关),在生物化学和分子生物学中用于按长度分离DNA和RNA片段的混合群体,以估计DNA和RNA片段的大小或通过电荷分离蛋白质。

通过施加电场使带负电荷的分子穿过琼脂糖或其他物质的基质,从而分离核酸分子。较短的分子比较长的分子移动更快并且迁移得更远,因为较短的分子更容易通过凝胶的孔迁移。这种现象称为筛分。琼脂糖中的电荷将蛋白质分开,因为凝胶的孔太小,无法筛分蛋白质。凝胶电泳也可用于分离纳米颗粒。

凝胶过滤层析和凝胶电泳的原理、操作方法和结果有何不同?

凝胶过滤是利用分子大小差异进行分离的。原理是:凝胶具有孔隙,大的蛋白质分子不能进入孔隙,直接被冲洗下来,用时短,小分子蛋白以不同程度进入孔隙,所走路径长,用时长。所以蛋白得以分离。

电泳是利用所带电荷不同来分离的。带电荷的蛋白以不同速度向相反电级处移动,所带电荷大的移动的快,小的慢。

凝胶色谱法和电泳法的原理?

电泳的基本原理是:生物大分子如蛋白质,核酸,多糖等大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。

凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术,是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术,由于设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质有很高的分离效果。

凝胶色谱法又称分子排阻色谱法。凝胶色谱法主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。根据分离的对象是水溶性的化合物还是有机溶剂可溶物,又可分为凝胶过滤色谱(GFC)和凝胶渗透色谱(GPC)。GFC一般用于分离水溶性的大分子,如多糖类化合物。凝胶的代表是葡萄糖系列,洗脱溶剂主要是水。

凝胶渗透色谱法主要用于有机溶剂中可溶的高聚物(聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)相对分子质量分布分析及分离,常用的凝胶为交联聚苯乙烯凝胶,洗脱溶剂为四氢呋喃等有机溶剂。

凝胶色谱不但可以用于分离测定高聚物的相对分子质量和相对分子质量分布,同时根据所用凝胶填料不同,可分离油溶性和水溶性物质,分离相对分子质量的范围从几百万到100以下。。

凝胶电泳是定性分析还是定量分析?

属于定性分析,也属于半定量分析,属于前者更合理一点。

凝胶电泳又叫琼脂糖凝胶电泳,一般是用来分析pcr(聚合酶链式反应)实验以后pcr产物的一个实验,若pcr能正常扩增出自己需要的产物,则在电泳后,胶在紫外下对应的位置会显示出相应的条带,若没有扩增出来产物则不会有条带,这属于定性分析。有时候实验人员会根据条带亮度判定扩增效率,以及大概得基因表达情况,这应该属于半定量范畴。

凝胶电泳里面是什么液体?

凝胶电泳里面的液体是磷酸缓冲液

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